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        上海晶抗生物操作ELISA試劑盒實驗中的技巧
        發布時間:2022-08-10   點擊次數:83次

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        ELISA是一種敏感性高、特異性強、重復性好的實驗方法,其具有試劑穩定、易保存、操作簡便、結果判斷較客觀等特點,但是在操作過程中還是需要注意下列問題:

        1、切記在加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。

        2、合理安排檢測量,以免反應板過多造成洗板等待時間長。

        3、在吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。

        4、務必做雙孔實驗,這樣才既能保證數據的準確性,又能反映出試劑盒的精密度。

        5、樣品稀釋液應用加液器加注,并經常校對其準確性。

        6、為防止樣品蒸發,試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,酶標板加上蓋或覆膜。

        7、未使用完的酶標板或者試劑,請于2-8℃ 保存。辣根過氧化物酶標記抗人IgG 工作液請依據所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過的辣根過氧化物酶標記抗人IgG 工作液。

        8、ELISA試劑盒實驗中,加樣后及時放人孵箱,標本較多時,要分批操作。按說明步驟嚴格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗徹底。

        9、剩余樣品及廢棄物應經121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘,或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理 30 分鐘后廢棄。

        10、人ELISA試劑盒洗滌時各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。

        11、每次實驗留一孔作為空白調零孔,該孔不加任何試劑,只是最后加底物溶液2N H2SO4。測量時先用此孔調OD值至零。

        12、手工洗板時每次加入洗滌液后,應靜置 15~30s,不要將一個酶標孔中的洗滌液濺入另一酶標孔中,防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標板放在毛巾或吸水紙上拍干。

        13、對樣本的結果有疑問時需要使用其他檢測方法進行驗證。

        14、沒有去離子水或雙蒸水時,可以使用娃哈哈純凈水等配制溶液,切勿使用自來水。

        15、在使用微量加樣器時,吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭,及時吸取標準品溶液。

        16、吸取液體時速度不易太快,以免產生氣泡。

        為了得到準確有效的結果,大家在實驗操作過程中一定要注意這些問題。


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